用明胶包被培养皿是因为某些细胞的性质特点,决定它们需要附着在支持物上面生长,比如说胃上皮细胞和肝细胞等等。而白血病细胞与骨髓细胞白则可悬浮生长。这类细胞的培养都需要添加血清。
那么,如何用明胶包被培养皿?
首先,要从配置0.1%的明胶溶液开始:
1.准确称量0.1g的明胶,溶于mp(过热蒸汽)的三蒸水中,放进56℃的水浴箱中进行充分溶解;
2.使用0.22um的滤器对明胶溶液进行过滤除菌。过滤的作用,一来是可以除菌,二来是除去溶液中没有溶解的颗粒,这样接下来的铺板才能更加均匀。
3.除菌完毕后,将明胶溶液放在培养瓶中用封口膜封好,无菌存储备用。
0.1%的明胶溶液配置完成,就可以用来包被培养皿了:
1.取消毒过的干净培养皿,加入适量的0.1%的明胶,以没过整个底面之后再稍微加一点为宜。这个过程不能产生气泡,不然就会导致明胶铺的不均匀,甚至有些地方没有铺上,这样不利于细胞的贴壁;
2.加入明胶之后,将培养皿放置在超净台内30分钟,或者放置在37℃饱和湿度培养箱里20分钟;
3.吸干净明胶后,可直接使用,或在饱和湿度的培养箱中放30分钟,效果更佳。